少妇高潮尖叫声久久a片,全文辣肉h短篇春野小农民,国产精品久久久久久无码,99精品久久99久久久久

您好,歡迎進(jìn)入上海莼試生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
全國服務(wù)熱線:13585831301
上海莼試生物技術(shù)有限公司
您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 大鼠角膜成纖維細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟

大鼠角膜成纖維細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟

瀏覽次數(shù):423發(fā)布日期:2024-06-27

大鼠角膜成纖維細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。


Contact Us
  • 聯(lián)系QQ:3004972506
  • 聯(lián)系郵箱:sdfskdfhs3004972506@qq.com
  • 傳真:86-021-60443211
  • 聯(lián)系地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661

掃一掃  微信咨詢

©2024 上海莼試生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有  備案號(hào):滬ICP備17029297號(hào)-3  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    GoogleSitemap    總訪問量:105676 管理登陸

《性妲己》电影在线观看| 人人妻人人藻人人爽欧美一区| 农民工猛吸女大学奶头| 天天躁夜夜躁狠狠躁av乐播蜜桃| 一本色道在线久88在线观看片| 美国式禁忌2| 亲嘴扒胸摸屁股激烈网站| a片在线免费观看| 欧美在线精品一区二区三区不卡| 日本xxxb孕妇孕交视频| 国产人成视频在线观看| 无码人妻一区二区三区| 女人下边紧了好还是松点好| 粉嫩名器少妇名器| 精品一区二区三区免费毛片w| 无码人妻一区二区三区在线视频| 99久久精品免费看国产| 高h小月被几个老头调教| 精品久久久久久无码人妻中文| 日日躁夜夜躁狠狠躁| 爆乳2把你榨干哦| 亚洲尺码与欧洲尺码区别入口跳转| 国产山东48老熟女嗷嗷叫白浆| 国产又粗又猛又爽又黄的视频| 日韩精品无码中文字幕一区二区| 阳茎伸入女人阳道视频免费| 日韩a片无码毛片免费看小说| 一 级 黄 色 片免费网站| 娇妻互换享受高潮| 粗大好烫轻点太深好硬好涨视频| 女人高潮真实叫床声mp3| 国产乱人伦精品一区二区| 人妻无码中文字幕| 日本精品人妻无码免费大全| 99久久精品国产亚洲av| 无码gogo大胆啪啪艺术| 性XXXX入欧美| 极品白嫩的小少妇| 久碰人妻人妻人妻人人掠| 欢乐颂3电视剧全集免费观看| 国产在线观看国偷精品产拍|